adarbiotech環(huán)氧活化珠說(shuō)明書(shū)

成立于2006年3月的Adar Biotech是下一代醫(yī)療技術(shù)的開(kāi)發(fā)商。該公司開(kāi)發(fā)了用于增強(qiáng)藥物輸送的微型醫(yī)療設(shè)備，并開(kāi)發(fā)了另一種具有國(guó)土安全/生物應(yīng)用的醫(yī)療設(shè)備。該公司還向研究團(tuán)體提供產(chǎn)品和服務(wù)。Adar Biotech生產(chǎn)功能性樹(shù)脂和重組蛋白，并為客戶提供免疫學(xué)和細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)。

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環(huán)氧活化珠

Epoxy-Activated Beads

Adar的環(huán)氧活化微珠是一種通用產(chǎn)品，可將胺和含羥基的配體與微珠上存在的游離環(huán)氧基結(jié)合。就配體結(jié)合而言，所得的連接既穩(wěn)定又起作用。

Epoxy-Activated Beads Cat. 1004-5/10/25

多用途激活支持版本。1.2 2007年3月

介紹

環(huán)氧活化珠是一種含有高密度環(huán)氧基的預(yù)活化載體，用于固定各種配體。通過(guò)與氨基、硫醇和羥基的穩(wěn)定連接，該載體可用于固定蛋白質(zhì)、碳水化合物和各種配體。當(dāng)ph值為11-13時(shí)，與羥基的偶聯(lián)反應(yīng)為有利，而含巰基的配體在ph值為7.5-9.0時(shí)，偶聯(lián)反應(yīng)為有利。

環(huán)氧樹(shù)脂活化珠特性

基質(zhì)：sepharose cl-4b

活性組：Oxiran。

活性組密度：10–25μmole/ml

珠徑：45-165微米

珠狀結(jié)構(gòu)：高度交聯(lián)的球形瓊脂糖，6%

大背壓：0.3Mpa，3bar

大流速：4ml/min/cm~2

建議流速：1-2ml/min/cm~2

基質(zhì)穩(wěn)定性：ph 2-11。

方案：將配體固定在環(huán)氧樹(shù)脂活化的珠上

A.所需緩沖器

通常在碳酸鹽、硼酸鹽或磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行耦合。鈉

氫氧化物可用于提高緩沖劑。避免使用含有三胺或游離胺的緩沖劑。

結(jié)合過(guò)程中的緩沖液和其他親核試劑，因?yàn)檫@些基團(tuán)可能與

環(huán)氧基。如果需要有機(jī)溶劑溶解配體，

二甲基甲酰胺和二氧六環(huán)的用量可達(dá)終體積的50%。這個(gè)

相同濃度的有機(jī)溶劑應(yīng)包含在

以避免配體在偶聯(lián)過(guò)程中沉淀。

配體與10毫升環(huán)氧活化珠結(jié)合所需的緩沖液。

一。雙蒸餾水（100毫升）。

2.耦合緩沖液（50ml）：碳酸氫鈉或碳酸鹽緩沖液ph-8-10。也可使用中性共軛緩沖液，但宜使用堿性偶聯(lián)緩沖液：使用DDH2O或磷酸鹽緩沖液，如PBS。

三。封閉液（100毫升）：1米乙醇胺，pH值8.0。

四。洗滌緩沖液（200毫升）：PBS pH 7.4。

B.協(xié)議

一。輕輕混合珠子，形成均勻的混合物，并用吸管移走所需數(shù)量的珠子。用雙蒸餾水清洗珠子3次。洗滌可以使用合適的濾漏斗或通過(guò)每分鐘1分鐘的離心循環(huán)進(jìn)行，在大約600～1000 xg下進(jìn)行。不要超過(guò)1000xg，因?yàn)橹樽涌赡軙?huì)變形。

2.在耦合緩沖液中溶解配體。可使用有機(jī)溶劑。對(duì)于大配體（即分子量大于10000的蛋白質(zhì)），制備2-10 mg/ml的溶液；對(duì)于小配體，例如小肽，制備每ml耦合緩沖液中至少200μmoles配體的溶液。

三。將兩體積的配體溶液加入到一體積的洗滌環(huán)氧樹(shù)脂中

在聚丙烯管和輕輕混合珠。樣品100ul上清液

（不含珠子）在時(shí)間零點(diǎn)作為參考樣品并保存在冰箱中。

四。在4oC至45℃之間緩慢混合（配體的穩(wěn)定性限制頂線溫度），優(yōu)選使用搖臂。不要用磁力攪拌器攪拌

5。樣品100ul上清液（不含珠子）的接合效率

利用耦合緩沖液去除未結(jié)合的生物分子，測(cè)定并清洗多余的配體。

6.加入大約兩個(gè)凝膠體積的封閉溶液。放置至少4小時(shí)或在4℃下過(guò)夜。

7號(hào)。在室溫下用20體積的清洗緩沖液清洗凝膠三次，以去除未粘合的乙醇胺。

C.儲(chǔ)存

將凝膠冷藏在磷酸鹽緩沖鹽（PBS）或添加0.1%疊氮化物（W/V）作為防腐劑的其他配體兼容緩沖液中，直至使用。