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      qa-bio E-EF01說明書

       更新時(shí)間:2021-05-20 點(diǎn)擊量:1294

      qa-bio E-EF01說明書

       

      Endo F1

      遠(yuǎn)藤F1圖片

      Endo F1從肽和蛋白質(zhì)中裂解出高甘露糖和一些雜合型N-聚糖

       

      部件號(hào)–酶量
      E-EF01 – 60 µLs¹ 
      E-EF01-20 – 20 µls¹ 
      E-EF01-200 – 200 µls²¹
        含緩沖液
        ²僅含酶

       

      產(chǎn)品描述

       

      內(nèi)切F1,內(nèi)切糖苷酶F1,內(nèi)-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶F

      Endo F1裂解天冬酰胺連接的高甘露糖和一些雜合寡糖。核心巖藻糖基化將活性降低了50倍。糖苷內(nèi)切酶F1將水解含有高甘露糖鏈的硫酸鹽。其在寡糖的二乙酰基殼二糖核心中的兩個(gè)N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解,產(chǎn)生截短的糖分子,其中一個(gè)N-乙酰氨基葡糖殘基保留在天冬酰胺上。相反,PNGase F可以完整清除寡糖。

      附加遠(yuǎn)藤?F產(chǎn)品
      內(nèi)切糖苷酶F2釋放雙觸角和高甘露糖聚糖(以40X減小的速率)
      內(nèi)切糖苷酶F3將釋放triantennarry和巖藻糖基雙觸角N-聚糖
      遠(yuǎn)藤?F多套件包括每個(gè)遠(yuǎn)藤?F酶和它們的緩沖器中的20個(gè)μLs。

      重組Elizabethkingia miricola(是腦膜膿毒性金黃)在大腸桿菌

      EC 3.2.1.96

      內(nèi)切F1特異性裂解所有與天冬酰胺連接的高甘露糖和一些雜合寡糖

      內(nèi)容
      在20mM的Tris-HCl 60酶微升等分試樣(1 U),pH 7.5中

      隨附20 µL和60 µL的包裝尺寸:
      5倍反應(yīng)緩沖液– 250 mM磷酸鈉,pH 5.5

      比活度> 16 U / mg
      活度> 17 U / ml

      分子量32,000道爾頓

      建議用法
      1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去離子水將最終體積調(diào)整為38 µl。
      2.添加10 µl 5x反應(yīng)緩沖液5.5。3 
      .添加2.0 µl Endo F1。在37°C下孵育1小時(shí)。

      比活性
      定義為在37°C,pH 5.5下,在1分鐘內(nèi)催化1微摩爾變性核糖核酸酶B(RNase B)釋放N-連接寡糖所需的酶量。通過SDS-PAGE監(jiān)測(cè)切割(切割的RNase B遷移更快)。

      儲(chǔ)存將酶保存在4?C下??。

      穩(wěn)定性正確存放后至少可穩(wěn)定12個(gè)月。幾天暴露于環(huán)境溫度不會(huì)降低活性。

      純度如下測(cè)試內(nèi)切糖苷酶F1對(duì)蛋白酶的污染。將10μg變性的BSA與2μL酶在37oC下孵育24小時(shí)。經(jīng)處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。

      生產(chǎn)宿主菌株已經(jīng)過廣泛測(cè)試,不會(huì)產(chǎn)生任何可檢測(cè)的糖苷酶。

       

       

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