Human α-thrombin
產(chǎn)品概述
凝血酶
原的蛋白水解活化 絲氨酸蛋白酶α凝血酶是由酶原凝血酶原的蛋白水解活化產(chǎn)生的。酶復(fù)合物凝血酶原酶催化凝血酶原中兩個肽鍵的蛋白水解，從而產(chǎn)生NH2末端衍生的F1.2區(qū)和異二聚體α-凝血酶。α-凝血酶由“A"鏈（Mr=6000）組成，該鏈通過單個二硫鍵與“B"鏈（Mr=31，000）共價連接
α-凝血酶是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶，由酶原凝血酶原的蛋白水解活化產(chǎn)生 （1）。在凝血過程中，凝血酶切割纖維蛋白原形成纖維蛋白，導(dǎo)致凝血的最終步驟，形成纖維蛋白凝塊。凝血酶還負(fù)責(zé)促因子因子V和因子VIII的反饋激活。據(jù)報(bào)道，凝血酶可激活因子XIII和血小板，也可作為血管收縮蛋白發(fā)揮作用。凝血酶的促凝血活性以兩種方式被阻止：1）肝素輔因子II或抗凝血酶III/肝素復(fù)合物的抑制;或2）用血栓調(diào)節(jié)蛋白形成復(fù)合物。凝血酶/血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物的形成導(dǎo)致凝血酶無法裂解纖維蛋白原并激活因子V和VIII，但增加了凝血酶激活抗凝劑蛋白C的效率。
凝血酶是一種雙鏈酶，由NH2末端“A"鏈（Mr=6，000）和COOH末端“B"鏈（Mr=31，000）組成，它們通過單個二硫鍵保持共價連接。人凝血酶比牛凝血酶短 13 個氨基酸，這是由于人蛋白上的凝血酶切割位點(diǎn)在牛蛋白中不存在。
凝血酶還用于細(xì)菌中表達(dá)的融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割 （9-11）。凝血酶敏感位點(diǎn)摻入目標(biāo)重組蛋白與肽或蛋白質(zhì)之間，以促進(jìn)純化和/或表達(dá)。靶蛋白通過與凝血酶的切割從表達(dá)的雜交體中釋放出來。凝血酶可以通過親和色譜輕松去除。
人、牛和小鼠凝血酶由純化的凝血酶原制備，使用Nesheim等人（2）描述的Lundblad程序（1）的修改。凝血酶以 50%（體積/體積）甘油/H 2 O 形式提供，應(yīng)儲存在 -20oC。純度通過SDS-PAGE分析確定，并在凝血酶特異性凝血測定中測量活性，并與標(biāo)準(zhǔn)化的NIH凝血酶進(jìn)行比較。凝血酶也可在活性位點(diǎn)被 DFP、FPRck 或生物素化的 FPRck 阻斷的情況下使用。
融合蛋白的切割 凝血酶除了在凝血研究中的廣泛應(yīng)用外，還可用于融合蛋白
的位點(diǎn)特異性切割。凝血酶敏感位點(diǎn)摻入目標(biāo)重組蛋白與肽或蛋白質(zhì)之間，以促進(jìn)純化和/或表達(dá)。靶蛋白通過與凝血酶的切割從表達(dá)的雜交體中釋放出來。凝血酶可以通過親和色譜輕松去除。批次間的一致性確保每次結(jié)果的可重復(fù)性。對于涉及細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)，請聯(lián)系我們討論指ding用于細(xì)胞培養(yǎng)的定制低內(nèi)毒素批次。
地方化血漿
作用方式絲氨酸蛋白酶，可切割纖維蛋白原形成纖維蛋白;還負(fù)責(zé)蛋白C的活化，血小板活化和促因子的反饋活化，因子V和因子VIII的激活
分子稱量36,700 (3-6)
消光系數(shù)E 1 %
1 厘米米，280 納米
= 18.3 （人類） （6）
= 19.5 （牛） （7）
具體活動約 3800 NIH 單位/毫克
等電點(diǎn)7.0-7.6 （人類） （3）
結(jié)構(gòu)兩個亞單位，大約 Mr=6，000 和 31，000
碳水化合物百分比約5%
大小100微克，1毫克，10毫克（1毫克小瓶）
配方50%甘油/水（V/V）
存儲-20°C
純度>95% 來自 SDS-PAGE
活動確定纖維蛋白原凝血或顯色測定
保質(zhì)期（正確儲存）12 個月
產(chǎn)品詳情
名稱 Human α-thrombin
編號 HCT-0020
品牌 haemtech
