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      QA-bio E-PNG01 說明書

       發布時間:2017/10/19 點擊量:675

      世界*實驗材料供應商QA-Bio 正式授權上海起發為其中國代理,QA-Bio  在一直是行業的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產品和服務,上海起發一直秉承為中國科研客戶帶來的產品,的服務, 簽約QA-Bio  就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產品和服務,您的滿意將是我們zui大的收獲

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      QA-bio公司是一家致力于提供糖基化研究工具的專業公司,所提供的糖基化研究產品涵蓋糖苷內/外切酶,去糖基化酶,唾液酸產品,多糖產品純化試劑盒,多糖標記試劑盒,HPLC柱及其緩沖液,同時公司還提供多糖分析服務。此外,公司還提供部分分子生物學產品。

       

      產品線:

      碳水化合物分析用的酶
          聚糖標準品
          糖純化
          Ludger Tag聚糖標記試劑盒
          糖生物學用HPLC色譜柱
          糖測序試劑盒

      去糖基化試劑盒
          MS / MS數據分析工具

       

      PNGase F

      PNGase F從糖蛋白切割N-連接(天冬酰胺連接)寡糖。

      0.3單位/ 60 uL 
      包括酶,緩沖液,變性劑和Triton-X。

      貨號: E-PNG01

      肽N糖苷酶F,N-糖苷酶,PNGase F

      PNGase F從糖蛋白切割N-連接(天冬酰胺連接)寡糖。PNGase F將天冬酰胺分解成天冬氨酸,保留寡糖。變性會使裂解率提高到100倍。大多數天然蛋白質仍然可以*N-去糖基化,但是孵育時間必須增加。PNGase F將在孵育條件下保持活性至少72小時。PNGase F不會去除在植物糖蛋白上通常發現的含有α-(1,3)連接的核心巖藻糖的寡糖; 為此,使用肽N-糖苷酶A.

      來源 Elizabethkingia miricola(是Chryseobacterium meningosepticum

      EC 3.5.1.52

      內容物將
      60μl等份的PNGase F(0.3U)在20mM Tris-HCl,pH7.5中

      5×反應緩沖液7.5,用于PNGase F - 250mM磷酸鈉,pH7.5

      變性溶液 - 2%SDS,1Mβ-巰基乙醇

      Triton X-100 - 15%溶液

      比活性 > 25 U / mg

      活性 5 U / ml

      分子量 36,000道爾頓

      PNGase F 6-10的pH范圍,*7.5

      PNGase F建議用法
      1.加入200μg糖蛋白至Eppendorf管。用去離子水調節至35μl終體積。
      2.加入10μl5x PNGase F反應緩沖液7.5和2.5μlPNGase F變性溶液。在100°C下加熱5分鐘。
      酷。加入2.5μlPNGase F Triton X-100并混合。
      4.向反應物中加入2.0μlPNGase F。在37°C孵育3小時。

      特異性切除所有天冬酰胺連接的復合物,高甘露糖寡糖,除非alpha(1-3)核心巖藻糖基化; 天冬酰胺必須在兩個末端都有肽鍵,Endo F自由

      比活性定義為在37℃,pH7.5下在1分鐘內催化從1微摩爾變性的BSA和RNA酶B中釋放N-連接的寡糖所需的酶量。裂解通過SDS-PAGE(切割的RNA酶B遷移更快)來監測。

      儲存酶在4°C。

      PNGase F參考

      - 拜耳,EA,F. De Meester,T. Kulik和M. Wilchek。去糖基化蛋白抗生物素蛋白的制備 Appl Biochem Biotech 53: 1-9(1995)

      - 長老,JH和S.亞歷山大。內切-BN-乙酰氨基葡萄糖苷酶F:來自腦膜炎桿菌的內切糖苷酶,其切割高甘露糖和復合糖蛋白。Proc Natl Acad Sci USA 79: 4540-4544(1982)

      - Tarentino,A .L.,CMGomez和TH Plummer,Jr.Depososylation of asparagine-linked glycans by peptide:N-glycosidaseF.Biochemistry 24: 4665-4671(1985)

      - Tarentino AL和TH Plummer。天冬酰胺連接的聚糖的酶解脫糖基化:來自腦膜炎黃桿菌的寡糖切割酶的純化,性質和特異性。Meth Enzymol 230: 44-57(1994)

      - Trimble RB和AL Tarentino。鑒定腦膜炎黃桿菌中不同的糖苷內切酶(endo)活性:內源F1,endo F2和endo F3。Endo F1和endo H僅水解高甘露糖和雜聚糖。J Biol Chem 266: 1646-1651(1991)

      - Taga,EM,A. Waheed和RL Van Etten。來自杏仁的均一肽-N-糖苷酶的結構和化學表征。Biochemistry 23: 815-22(1984)

       

       

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