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      CompTech MCAR 說明書

       發布時間:2018/7/4 點擊量:494

       

      上海起發為complementtech一級經銷商,Complement Technology,Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購Advanced Research TechnologiesComplement Technology繼續為世界各地的科學家提供高質量的試劑,并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應用提供試劑和使用我們補充試劑的建議。 

      CompTech MCAR 說明書

      名稱:       MCAR(Mouse Complement Assay Reagent)

      目錄編號:     B250

      可用尺寸:        1.0 mL

      濃度:          > 0.4 mg / mL  

      形式:                         冷凍溶液

      緩沖區:                       VBS

      防腐劑:             0.025%sodium azide

      存儲:                     -70 Ò C或以下。

      來源:                       兔子

      產地:                       在美國制造。

       

       

      一般描述

      小鼠補體很難分析。  小鼠血清迅速喪失其活性,小鼠血清的典型滴度遠低于人血清中發現的150-200 CH50單位/ mL。  小鼠品系的補體CH50滴度差異很大(參考文獻1,2和3),許多常見的小鼠品系在遺傳上缺乏C5(參考文獻4和5),這意味著它們即使具有*功能性的補體也不能溶解細胞。系統。  C5足夠菌株中低滴度的確切原因尚不*清楚,并且它們對于不同的小鼠品系可能是不同的。  然而,常見的原因是小鼠經典途徑組分未被與EA結合的標準抗體有效激活。  在Complement Technology,Inc。,我們開發了一種*的溶血試劑(MCAR =小鼠補體分析試劑),可以使綿羊紅細胞敏感,從而提供改善的小鼠CH50滴度。  例如,市售的小鼠補體在下述測定系統中表現出僅約12單位/ mL的CH50,然而,在MCAR存在的情況下,CH50是217.這是MCAR補體效價的18倍。  這在數值上與正常人血清CH50相當,但是測定是不同的。  目前我們不能說這種試劑可以使用多少小鼠品系,但是我們已經使用了3個MCAR,并且它對所有人都起到了同樣的作用。  

      小鼠血清在小鼠體外也極不穩定。  我們已經(如果在4左100%的損失解凍后觀察到活性的快速損失ö ℃過夜)。  因此,我們建議快速解凍NMS并立即在分析中使用它,或者是否需要等分和冷凍NMS。 應在水浴中快速解凍,解凍后立即移至濕冰中,等分并盡快重新冷凍。  使用時,僅在實驗裝置準備好NMS樣品時解凍,并在解凍后將其保持在濕冰上。

       

      測定

      在補體測定中,即使來自相同的小鼠品系,每批小鼠補體也將具有不同的滴度。  需要進行初步測定以確定要使用的正確NMS量。  如果MCAR增強裂解,正常致敏綿羊細胞(EA)效果很好。  大多數NMS樣品通常含有大量血紅蛋白,因此使用的血清越多,背景越高。  樣品測定方案顯示在下表中,其中總測定體積在100uL /測定下保持小。  通常,管應在室溫下設置緩沖液和MCAR。  然后加入EA,混合并在室溫下溫育5分鐘。    在室溫下將MCAR與EA細胞孵育5分鐘或更長時間后,加入NMS以開始測定。  管應該被混合,并轉移到一個37 ö ℃水浴用于與通過偶爾(每5-10分鐘)再懸浮30分鐘渦旋。 

       

      需要注意的一點是,在將EA與MCAR混合后不要將EA離心,并且不要制備EA和MCAR的主混合物,然后移液到管中。  這些程序將導致不一致的結果。

       

      在37 30分鐘后Ó C中,測定法是用200稀釋微升冷GVBE,通過混合,渦旋,離心以沉淀未裂解的細胞和200 微升的上清液應轉移到一個平底微量和吸光度在415nm讀。  或者,可以使用微量比色皿和分光光度計。 

       

      EA 在GVB ++中以5×10 8 / ml使用,所有稀釋在GVB ++緩沖液中進行。

                   

      Protocol for Titering Normal Mouser Serum and MCAR

      Mix &

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

       

      Spin

      %

       

       

       

       

       

       

      5 min

      Mouse

       

      30 min

      Cold

      A415

      Lysis

      #

      GVB++

      H2O

      GVBE

      MCAR

      EA

      21oC

      Serum

      Mix

      @ 37

      GVBE

       

       

      1

       

       

      70 uL

      10 uL

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      2

       

       

      70 uL

      10 uL

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      3

      90 uL

       

       

       

      10uL

       

       

       

       

      200 uL

       

       

      4

      90 uL

       

       

       

      10uL

       

       

       

       

      200 uL

       

       

      5

       

      80 uL

       

       

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      6

       

      80 uL

       

       

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      7

      85 uL

       

       

      0 uL

      10uL

       

      5 uL

       

       

      200 uL

       

       

      8

      80 uL

       

       

      0 uL

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      9

      70 uL

       

       

      0 uL

      10uL

       

      20 uL

       

       

      200 uL

       

       

      10

      60 uL

       

       

      0 uL

      10uL

       

      30 uL

       

       

      200 uL

       

       

      11

      80 uL

       

       

      5 uL

      10uL

       

      5 uL

       

       

      200 uL

       

       

      12

      75 uL

       

       

      5 uL

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      13

      65 uL

       

       

      5 uL

      10uL

       

      20 uL

       

       

      200 uL

       

       

      14

      55 uL

       

       

      5 uL

      10uL

       

      30 uL

       

       

      200 uL

       

       

      15

      75 uL

       

       

      10 uL

      10uL

       

      5 uL

       

       

      200 uL

       

       

      16

      70 uL

       

       

      10 uL

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      17

      60 uL

       

       

      10 uL

      10uL

       

      20 uL

       

       

      200 uL

       

       

      18

      50 uL

       

       

      10 uL

      10uL

       

      30 uL

       

       

      200 uL

       

       

      19

      70 uL

       

       

      15 uL

      10uL

       

      5 uL

       

       

      200 uL

       

       

      20

      65 uL

       

       

      15 uL

      10uL

       

      10 uL

       

       

      200 uL

       

       

      21

      55 uL

       

       

      15 uL

      10uL

       

      20 uL

       

       

      200 uL

       

       

      22

      45 uL

       

       

      15 uL

      10uL

       

      30 uL

       

       

      200 uL

       

       

      23

      80 uL

       

       

      10 uL

      10uL

       

       

       

       

      200 uL

       

       

      24

      80 uL

       

       

      10 uL

      10uL

       

       

       

       

      200 uL

       

       

                   

      通過從每個實驗測定的A415值(例如#7-22)中減去背景A415值(#1和2的平均值)并除以大裂解(#5和6的平均值)減去%Lysis。背景,然后乘以100。

       

      參考

      1.   具有典型哺乳動物補體活性水平的Ong GL和Mattes MJ小鼠品系。J Immunol Methods 125:147-158,1989。

       

      2.   van Dijk,H。等人。  利用致敏兔紅細胞估計小鼠補體活性的經典途徑。J Immunol Methods 39:257-268,1980。

       

      3.   特里WD等人。  近交系小鼠血清補體活性的差異。  J Immunol。92:576-578,1964。

       

      4.   Nilsson UR和Muller-Eberhard,HJ缺乏繼承補體缺陷的小鼠的第五組分。J Exp。醫學。124:1-16,1967。

       

      5. Wetsel,RA等人。小鼠第五補體成分(C5)的缺乏。5'-外顯子中的2堿基對基因缺失。J. Biol。化學。265:2435-2440,1990。 

       

       

      僅供研究使用。

      不適合人類或藥物使用。

       

       

       

      complementtech產品目錄:

       

      貨號

      品名

      規格 

      目錄價

      品牌

      A098

      C1

      200µg

      3400

      complementtech

      A099

      C1q

      1000µg

      3162

      complementtech

      A100

      C1q (40% Glycerol)

      1000µg

      3162

      complementtech

      A102

      C1r Enzyme

      250µg

      3417

      complementtech

      A103

      C1s Proenzyme

      250µg

      3366

      complementtech

      A104

      C1s Enzyme

      250µg

      3281

      complementtech

      A140

      C1 Esterase Inhibitor

      1000µg

      3468

      complementtech

      A112

      C2

      50µg

      3298

      complementtech

      A113

      C3

      250µg

      2482

      complementtech

      A113c

      C3 (concentrated)

      1000µg

      7327

      complementtech

      A118

      C3a

      50µg

      3162

      complementtech

      A119

      C3a desArg

      50µg

      3043

      complementtech

      A114

      C3b

      250µg

      3094

      complementtech

      A115

      iC3b

      250µg

      3417

      complementtech

      A116

      C3c

      250µg

      3706

      complementtech

      A117

      C3d

      100µg

      3825

      complementtech

      A105

      C4

      250µg

      3468

      complementtech

      A105c

      C4 (concentrated)

      1000µg

      8245

      complementtech

      A106

      C4a

      50µg

      4114

      complementtech

      A107

      C4a desArg

      50µg

      4114

      complementtech

      A108

      C4b

      250µg

      2992

      complementtech

      A109

      C4b Binding Protein

      250µg

      4131

      complementtech

      A120

      C5

      250µg

      3570

      complementtech

      A144

      C

      30µg

      6188

      complementtech

      A144(300)

      C

      300µg

      詢價

      complementtech

      A145

      C desArg

      50µg

      4301

      complementtech

      A122

      C5b,6

      50µg

      3468

      complementtech

      A123

      C6

      250µg

      3366

      complementtech

      A124

      C7

      250µg

      3366

      complementtech

      A125

      C8

      250µg

      3536

      complementtech

      A126

      C9

      250µg

      3366

      complementtech

      A127

      SC5b-9 Complex

      100µg

      2992

      complementtech

      A135

      Factor B

      250µg

      3213

      complementtech

      A136

      Factor D

      25µg

      3417

      complementtech

      A137

      Factor H

      250µg

      2958

      complementtech

      A137c

      Factor H (conc.)

      10000µg

      詢價

      complementtech

      A138

      Factor I

      100µg

      3366

      complementtech

      A139

      Factor P

      100µg

      3468

      complementtech

      A150

      Cobra Venom Factor  (USA ONLY)

      1000µg

      3298

      complementtech

      A154

      Factor Ba

      100µg

      3298

      complementtech

      A155

      Factor Bb

      250µg

      6188

      complementtech

      A118

      C3a

      50µg

      3162

      complementtech

      A119

      C3a desArg

      50µg

      3043

      complementtech

      A106

      C4a

      50µg

      4114

      complementtech

      A107

      C4a desArg

      50µg

      4114

      complementtech

      A144

      C

      30µg

      6188

      complementtech

      A144(300)

      C

      300µg

      詢價

      complementtech

      A145

      C desArg

      50µg

      4301

      complementtech

      A300

      C1q-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A312

      C2-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A314

      C3-Dpl

      1ml

      2482

      complementtech

      A305

      C4-Deficient Guinea Pig

      1ml

      2448

      complementtech

      A308

      C4-Dpl           

      1ml

      2482

      complementtech

      A320

      C5-Dpl

      1ml

      2125

      complementtech

      A323

      C6-Dpl

      1ml

      2040

      complementtech

      A324

      C7-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A325

      C8-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A326

      C9-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A335

      Factor B-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A336

      Factor D-Dpl   

      1ml

      2074

      complementtech

      A337

      Factor H-Dpl

      1ml

      2686

      complementtech

      A338

      Factor I-Dpl    

      1ml

      2482

      complementtech

      A339

      Factor P-Dpl

      1ml

      2482

      complementtech

      A340

      C3/C4 Inactivated Serum

      1ml

      2074

      complementtech

      A399

      C1q/Factor D-Dpl  

      1ml

      2856

      complementtech

      A200

      Goat Anti-Human C1q     

      1ml

      1054

      complementtech

      A212

      Goat Anti-Human C2

      1ml

      2329

      complementtech

      A213

      Goat Anti-Human C3

      1ml

      1054

      complementtech

      A218

      Rabbit Anti-Human C3a

      1ml

      2550

      complementtech

      A205

      Goat Anti-Human C4

      1ml

      1054

      complementtech

      A206

      Rabbit Anti-Human C4a

      1ml

      2550

      complementtech

      A220

      Goat Anti-Human C5

      1ml

      1275

      complementtech

      A221

      Rabbit Anti-Human rC

      1ml

      2550

      complementtech

      A223

      Goat Anti-Human C6

      1ml

      1275

      complementtech

      A224

      Goat Anti-Human C7

      1ml

      1275

      complementtech

      A225

      Goat Anti-Human C8

      1ml

      1275

      complementtech

      A226

      Goat Anti-Human C9

      1ml

      1275

      complementtech

      A227

      Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)

      0.2ml

      2584

      complementtech

      A235

      Goat Anti-Human Factor B

      1ml

      1275

      complementtech

      A236

      Goat Anti-Human Factor D

      1ml

      2499

      complementtech

      A237

      Goat Anti-Human Factor H

      1ml

      1275

      complementtech

      A238

      Goat Anti-Human Factor I

      1ml

      1309

      complementtech

      A239

      Goat Anti-Human Factor P

      1ml

      1462

      complementtech

      A240

      Goat Anti-Human C1-INH        

      1ml

      1173

      complementtech

      A260

      Rabbit Anti-Human Vitronectin

      1ml

      1445

      complementtech

      NHS

      Human Serum

      1ml

      578

      complementtech

      GPS

      Guinea Pig Serum

      1ml

      714

      complementtech

      NRS

      Rat Serum

      1ml

      901

      complementtech

      NMS

      Mouse Serum   

      1ml

      1309

      complementtech

      B102

      GVB++ (with Ca and Mg)

      250ml

      1224

      complementtech

      B100

      GVB++ (with Ca and Mg)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B103

      GVB° (without Ca and Mg)

      250ml

      1224

      complementtech

      B101

      GVB° (without Ca and Mg)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B104

      GVBE (with EDTA)

      250ml

      1224

      complementtech

      B105

      GVBE (with EDTA)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B110

      SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

      250ml

      1870

      complementtech

      B111

      SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

      1 Liter

      5066

      complementtech

      B112

      VBS++ (with Ca and Mg)

      250ml

      1224

      complementtech

      B113

      VBS++ (with Ca and Mg)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B200

      EA (Ab-sensitized sheep E)

      5ml @ 5x108/ml

      3043

      complementtech

      B201

      EA (Ab-sensitized sheep E)

      10ml @ 5x108/ml

      4556

      complementtech

      B202

      EA (Ab-sensitized sheep E)

      20ml @ 5x108/ml

      6324

      complementtech

      B210

      Es (sheep E)

      20ml @ 5x108/ml

      2652

      complementtech

      B300

      Er (rabbit E)

      5ml @ 5x108/ml

      1649

      complementtech

      B301

      Er (rabbit E)

      10ml @ 5x108/ml

      2652

      complementtech

      B302

      Er (rabbit E)

      20ml @ 5x108/ml

      3893

      complementtech

      B400

      Zymosan (preactivated)

      10ml @ 1x109/ml

      2261

      complementtech

      B106

      MgEGTA

      10ml @ 0.1M

      1139

      complementtech

      B250

      MCAR

      1.0 ml

      2482

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      Hemolysin

      Hemolysin  NEW

      2.0 ml

      2040

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