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      CompTech EA 說明書

       發布時間:2018/7/4 點擊量:461

       

      上海起發為complementtech一級經銷商,Complement Technology,Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購Advanced Research TechnologiesComplement Technology繼續為世界各地的科學家提供高質量的試劑,并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應用提供試劑和使用我們補充試劑的建議。 

      CompTech EA 說明書

      名稱:   EA(抗體致敏綿羊紅細胞) 

           EA (antibody-sensitized sheep erythrocytes)                 

      目錄號:   B200 和B201 和B202           

      可用尺寸: 5 mL , 10 mL和20 mL                

      濃度:          5×10 8個細胞/ mL

      吸光度:              412nm處 = 0.87以1/50稀釋在去離子水中

      形式:                         液體 - 不要凍結

      活性:                     補體CH50檢測功能齊全

      緩沖區:                       GVB ++ (CompTech#B100和B102)

      防腐劑:             GVB ++含有0.025%sodium azide作為殺菌劑

      儲存:                     + 4 o C 避免冷凍。冷凍裂解細胞。    

      資源:                       正常 來自美國農業部注冊設施的羊血。

      產地:                       制造于美國。

       

      一般描述

                  涂有兔抗羊紅細胞抗血清(溶血素)的綿羊紅細胞傳統上用于測定血清樣品中補體經典途徑的活性。  這些測定產生血清的CH50滴度(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。 

                  在CH50測定(GVB ++)中使用的傳統緩沖液中以測定準備濃度提供EA 。  他們每周一早上準備新鮮,需要在 周五之前訂購,以便在下周接收。  它們在周一下午由隔夜快遞運送到周二(或大多數貨運的周三)。它們通常可在制備后使用2周。他們被運往冷,但并不在室溫下長時間傷害(請注意,循環60-90天,37 Ø ç 體內)。它們應該一次每次使用前(在500 3分鐘,4?1000×g下進行洗滌ö C)和再懸浮       在GVB ++中的原始濃度 以減少背景。  該程序也可用于濃縮細胞。  這可以通過減少用于重懸細胞的體積來實現。

       

      物理特征

                  由于以下原因,EA由IgM抗體制成。  IgM在激活經典途徑方面比IgG高約100倍,因為C1q必須與抗體上的至少兩個Fc結構域結合以進行激活。  因此,在敏感的測定中,已經估計每個EA少至10個IgM可以引起裂解,而IgG裂解每個EA需要大約1000個IgG(Ross,GD(1986))。  這主要是因為在IgM中,在每個分子上的固定位置上存在五個緊密間隔的Fc結構域。  因為表面上IgG分子的間隔更隨機,所以在細胞表面上的正確位置發現2至5個IgG分子以結合并激活C1的可能性較小。

       

      測定

                  盡管CH50滴度被廣泛使用并且作為補體活性的主要臨床試驗,但CH50測定程序尚未*標準化。  在研究實驗室中,有與實驗室一樣多的程序,但所有程序基本相似并且給出有用的結果。  可根據要求從CompTech獲得詳細的逐步典型CH50滴定方法。  簡而言之,稀釋含有補體的血清樣品,使得測定中的終稀釋度為1/100至1/500。  對照包括兩個沒有0%裂解背景補體的試管和兩個試管,其中用水代替緩沖液進行100%裂解對照。  在濕冰上應設置分析管。  用GVB +使體積達到1.3mL或水),將管混合并加入0.2mL 5×10 8EA / mL的細胞并混合。  的反應,應溫育在37 60分鐘 ö ℃水浴含有大約10周分鐘的間隔再混合。  1小時后,將剩余的細胞離心(500-1000×g,3分鐘),并在1cm比色皿中在541nm處測定上清液的吸光度。  有多種數學方法可用于繪制結果圖。通過在對數 - 對數圖上繪制x軸上的每個測定中使用的微升血清和y軸上的y /( 1-y),可以獲得幾乎的直線。  術語“y”是指裂解的細胞的比例,在0%裂解時為0,在30%裂解時為0.3,在50%裂解時為0.5,等等。  補體樣品的CH50值從該線在y軸上穿過1.0(50%裂解)獲得,并計算如下:CH50 = 1000除以血清的體積(以μL計),得到50%裂解。  例如,如果用5.6μL血清達到50%裂解,則CH 50 = 179單位/ mL。  應該注意的是,可以在應該是相同的樣品上獲得不同的CH 50值。  這是  CH50測定中涉及的大量變量的結果,包括在春季收獲的綿羊紅細胞比在秋季抽取的血液中的細胞更容易溶解,沒有兩個溶血素抗體很多是相同的,因為它們是由兔子等產生的抗血清制成的。

                 

      應用

                  EA可用于確定血清的CH50溶血滴度,即CH50(參見上文的測定)。  它們可用于使用耗盡的血清滴定單個補體成分的功能活性。  它們也可用于制備攜帶活化的補體中間體的細胞(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。  將EA與C1溫育以制備(EAC1)或C1和C4(EAC14)。  可以將EAC14細胞與C2一起溫育以制備攜帶經典途徑C3轉化酶的EAC142細胞,并且可以將EAC142與C3一起溫育以制備攜帶C5轉化酶的EAC1423細胞。  每種中間體可用于測定流體相組分的功能補體活性。  例如,EAC142細胞的裂解對低C3濃度極其敏感,并且即使在諸如血清的復雜混合物中,這也可用于滴定C3補體活性。

       

      規    

                  綿羊紅細胞(Es)用于人補體測定,部分是為了方便,但也因為它們缺乏人補體的膜結合調節劑。  對于人補體,在Es上不存在顯著水平的功能性DAF,CD59或CR1。  因此,Es對于它們缺乏膜調節活性是有用的。

       

      參考

      摩根,BP編輯。(2000)補充方法和協議。  Humana新聞。

       

      Dodds,AW和Sim,RB編輯(1997年)。補充實用方法(ISBN 019963539)牛津 大學 按, 牛津。

       

      Ross,GD(1986)補體系統的免疫生物學。(ISBN 0-12-5976402)奧蘭多學術出版社。

       

       

      僅供研究使用。

      不適合人類或藥物使用。

       

       

      complementtech產品目錄:

       

      貨號

      品名

      規格 

      目錄價

      品牌

      A098

      C1

      200µg

      3400

      complementtech

      A099

      C1q

      1000µg

      3162

      complementtech

      A100

      C1q (40% Glycerol)

      1000µg

      3162

      complementtech

      A102

      C1r Enzyme

      250µg

      3417

      complementtech

      A103

      C1s Proenzyme

      250µg

      3366

      complementtech

      A104

      C1s Enzyme

      250µg

      3281

      complementtech

      A140

      C1 Esterase Inhibitor

      1000µg

      3468

      complementtech

      A112

      C2

      50µg

      3298

      complementtech

      A113

      C3

      250µg

      2482

      complementtech

      A113c

      C3 (concentrated)

      1000µg

      7327

      complementtech

      A118

      C3a

      50µg

      3162

      complementtech

      A119

      C3a desArg

      50µg

      3043

      complementtech

      A114

      C3b

      250µg

      3094

      complementtech

      A115

      iC3b

      250µg

      3417

      complementtech

      A116

      C3c

      250µg

      3706

      complementtech

      A117

      C3d

      100µg

      3825

      complementtech

      A105

      C4

      250µg

      3468

      complementtech

      A105c

      C4 (concentrated)

      1000µg

      8245

      complementtech

      A106

      C4a

      50µg

      4114

      complementtech

      A107

      C4a desArg

      50µg

      4114

      complementtech

      A108

      C4b

      250µg

      2992

      complementtech

      A109

      C4b Binding Protein

      250µg

      4131

      complementtech

      A120

      C5

      250µg

      3570

      complementtech

      A144

      C

      30µg

      6188

      complementtech

      A144(300)

      C

      300µg

      詢價

      complementtech

      A145

      C desArg

      50µg

      4301

      complementtech

      A122

      C5b,6

      50µg

      3468

      complementtech

      A123

      C6

      250µg

      3366

      complementtech

      A124

      C7

      250µg

      3366

      complementtech

      A125

      C8

      250µg

      3536

      complementtech

      A126

      C9

      250µg

      3366

      complementtech

      A127

      SC5b-9 Complex

      100µg

      2992

      complementtech

      A135

      Factor B

      250µg

      3213

      complementtech

      A136

      Factor D

      25µg

      3417

      complementtech

      A137

      Factor H

      250µg

      2958

      complementtech

      A137c

      Factor H (conc.)

      10000µg

      詢價

      complementtech

      A138

      Factor I

      100µg

      3366

      complementtech

      A139

      Factor P

      100µg

      3468

      complementtech

      A150

      Cobra Venom Factor  (USA ONLY)

      1000µg

      3298

      complementtech

      A154

      Factor Ba

      100µg

      3298

      complementtech

      A155

      Factor Bb

      250µg

      6188

      complementtech

      A118

      C3a

      50µg

      3162

      complementtech

      A119

      C3a desArg

      50µg

      3043

      complementtech

      A106

      C4a

      50µg

      4114

      complementtech

      A107

      C4a desArg

      50µg

      4114

      complementtech

      A144

      C

      30µg

      6188

      complementtech

      A144(300)

      C

      300µg

      詢價

      complementtech

      A145

      C desArg

      50µg

      4301

      complementtech

      A300

      C1q-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A312

      C2-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A314

      C3-Dpl

      1ml

      2482

      complementtech

      A305

      C4-Deficient Guinea Pig

      1ml

      2448

      complementtech

      A308

      C4-Dpl           

      1ml

      2482

      complementtech

      A320

      C5-Dpl

      1ml

      2125

      complementtech

      A323

      C6-Dpl

      1ml

      2040

      complementtech

      A324

      C7-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A325

      C8-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A326

      C9-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A335

      Factor B-Dpl

      1ml

      2074

      complementtech

      A336

      Factor D-Dpl   

      1ml

      2074

      complementtech

      A337

      Factor H-Dpl

      1ml

      2686

      complementtech

      A338

      Factor I-Dpl    

      1ml

      2482

      complementtech

      A339

      Factor P-Dpl

      1ml

      2482

      complementtech

      A340

      C3/C4 Inactivated Serum

      1ml

      2074

      complementtech

      A399

      C1q/Factor D-Dpl  

      1ml

      2856

      complementtech

      A200

      Goat Anti-Human C1q     

      1ml

      1054

      complementtech

      A212

      Goat Anti-Human C2

      1ml

      2329

      complementtech

      A213

      Goat Anti-Human C3

      1ml

      1054

      complementtech

      A218

      Rabbit Anti-Human C3a

      1ml

      2550

      complementtech

      A205

      Goat Anti-Human C4

      1ml

      1054

      complementtech

      A206

      Rabbit Anti-Human C4a

      1ml

      2550

      complementtech

      A220

      Goat Anti-Human C5

      1ml

      1275

      complementtech

      A221

      Rabbit Anti-Human rC

      1ml

      2550

      complementtech

      A223

      Goat Anti-Human C6

      1ml

      1275

      complementtech

      A224

      Goat Anti-Human C7

      1ml

      1275

      complementtech

      A225

      Goat Anti-Human C8

      1ml

      1275

      complementtech

      A226

      Goat Anti-Human C9

      1ml

      1275

      complementtech

      A227

      Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)

      0.2ml

      2584

      complementtech

      A235

      Goat Anti-Human Factor B

      1ml

      1275

      complementtech

      A236

      Goat Anti-Human Factor D

      1ml

      2499

      complementtech

      A237

      Goat Anti-Human Factor H

      1ml

      1275

      complementtech

      A238

      Goat Anti-Human Factor I

      1ml

      1309

      complementtech

      A239

      Goat Anti-Human Factor P

      1ml

      1462

      complementtech

      A240

      Goat Anti-Human C1-INH        

      1ml

      1173

      complementtech

      A260

      Rabbit Anti-Human Vitronectin

      1ml

      1445

      complementtech

      NHS

      Human Serum

      1ml

      578

      complementtech

      GPS

      Guinea Pig Serum

      1ml

      714

      complementtech

      NRS

      Rat Serum

      1ml

      901

      complementtech

      NMS

      Mouse Serum   

      1ml

      1309

      complementtech

      B102

      GVB++ (with Ca and Mg)

      250ml

      1224

      complementtech

      B100

      GVB++ (with Ca and Mg)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B103

      GVB° (without Ca and Mg)

      250ml

      1224

      complementtech

      B101

      GVB° (without Ca and Mg)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B104

      GVBE (with EDTA)

      250ml

      1224

      complementtech

      B105

      GVBE (with EDTA)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B110

      SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

      250ml

      1870

      complementtech

      B111

      SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

      1 Liter

      5066

      complementtech

      B112

      VBS++ (with Ca and Mg)

      250ml

      1224

      complementtech

      B113

      VBS++ (with Ca and Mg)

      1 Liter

      3264

      complementtech

      B200

      EA (Ab-sensitized sheep E)

      5ml @ 5x108/ml

      3043

      complementtech

      B201

      EA (Ab-sensitized sheep E)

      10ml @ 5x108/ml

      4556

      complementtech

      B202

      EA (Ab-sensitized sheep E)

      20ml @ 5x108/ml

      6324

      complementtech

      B210

      Es (sheep E)

      20ml @ 5x108/ml

      2652

      complementtech

      B300

      Er (rabbit E)

      5ml @ 5x108/ml

      1649

      complementtech

      B301

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      10ml @ 5x108/ml

      2652

      complementtech

      B302

      Er (rabbit E)

      20ml @ 5x108/ml

      3893

      complementtech

      B400

      Zymosan (preactivated)

      10ml @ 1x109/ml

      2261

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      B106

      MgEGTA

      10ml @ 0.1M

      1139

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      B250

      MCAR

      1.0 ml

      2482

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      Hemolysin

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      2.0 ml

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