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      Haematologic HCIX-0040說明書

       發(fā)布時(shí)間:2018/10/15 點(diǎn)擊量:403

      Haematologic HCIX-0040說明書

      HTI HCIX-0040

       

      Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊(cè)公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),合同制造和合同研究。

       

      Haematologic HCIX-0040說明書

       

      Coagulation Factor IX

      凝血因子IX

       

       

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      HCIX-0040 人因IX

       

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      尺寸

      100微克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲(chǔ)

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動(dòng)決定

      凝血試驗(yàn)

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

      •  
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       BCIX-1040 牛因子IX 

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      尺寸

      100微克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲(chǔ)

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動(dòng)決定

      凝血試驗(yàn)

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

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      酶原因子IX是單鏈維生素K依賴性糖蛋白,其在肝臟中合成(1-3)。因子IX的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)類似于其他維生素K依賴性凝血因子的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)。NH 2 - 末端區(qū)域含有12個(gè)γ-羧基谷氨酸(gla)殘基,其促進(jìn)因子IX與帶負(fù)電荷的磷脂表面的鈣依賴性結(jié)合。與表皮生長因子(EGF)同源的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域跨越NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域和活化肽(Ala-146至Arg-180)之間的區(qū)域。

      因子IX由因子XIa或因子VIIa /組織因子/磷脂復(fù)合物激活。位點(diǎn)A處的切割(參見圖)產(chǎn)生中間體IXa,其隨后通過在位點(diǎn)B處的切割而轉(zhuǎn)化為*活性形式IXaβ.NH2-末端輕鏈(GLA和EGF結(jié)構(gòu)域)保持共價(jià)連接至COOH-末端重鏈。通過二硫鍵。絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體(Ser-365,His 221,Asp-269)位于重鏈中。因子IXaβ是“內(nèi)因子Xase復(fù)合物”(因子VIIIa / IXa / Ca2 + /磷脂)的催化組分,其將因子X蛋白水解活化為因子Xa。

      通過常規(guī)方法(4)和免疫親和層析(5)的組合從新鮮冷凍血漿制備人因子IX。通過Fujikawa等人描述的方法的改進(jìn),從新鮮的檸檬酸化牛血漿制備牛因子IX。(6)。純化的蛋白質(zhì)以50%(vol / vol)甘油/ H2O提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度,并使用因子IX凝固測(cè)定法測(cè)量活性。

       

      凝膠

      Novex 4-12%Bis-Tris

      加載

      人因子IX,每泳道1μg

      緩沖

      MOPS

      標(biāo)準(zhǔn)

      SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

       

      本土化

      等離子體

      血漿濃度

      4-5ug / ml(人)(1)

      行動(dòng)方式

      酶原; 絲氨酸蛋白酶因子IXa的前體

      分子量

      55,000(人類)(8)
      55,400(牛)(6)

      消光系數(shù)

      Ë

      1%

      1厘米,280納米

       

      = 13.2(人類)(7)

       

       

      = 12.0(牛)(6)

       

      等電點(diǎn)

      4.2-4.5(人類)(7)
      3.7(牛)(6)

      結(jié)構(gòu)體

      單鏈,NH2-末端gla-結(jié)構(gòu)域,兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域

      碳水化合物百分比

      17%(人類)(7)
      26%(牛)(6)

      翻譯后修改

      一個(gè)β-羥基天冬氨酸(9),十二個(gè)玻璃殘留物(7)

       

       

      1. Thompson,AR,Blood,67,565(1986)。
      2. Hedner,U。,et al。,In Hemostasis and Thrombosis,2nd edition,ed。RW Colman,J。Hirsh,VJ Marder,EW
      3. 薩爾茲曼,第39-47頁。JP Lippincott Co,費(fèi)城,1987年。
      4. Fujikawa,K.,Davie,EW。,Methods in Enzymology,45,74(1976)。
      5. Bajaj,SP,et al。,Prep。Biochem。,11,397(1981)。
      6. Jenny,RJ,et al。,Prep。Biochem。,16,227(1986)。
      7. Fujikawa,K。等,Biochemistry,12,4938(1973)。
      8. Discipio,RG等,Biochemistry,16,698(1977)。
      9. Osterud,B.,et al。,J.Biol。Chem。,253,5946(1978)。
      10. McMullen,BA,et al。,BBRC,115,8(1983)。

       

       

       

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