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      Haematologic HCPG-0131說明書

       發(fā)布時(shí)間:2018/10/16 點(diǎn)擊量:359

      Haematologic HCPG-0131說明書

      HTI HCPG-0131

       

      Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開發(fā),合同制造和合同研究。

       

      Haematologic HCPG-0131說明書

      glu-Plasminogen,lys-Plasminogen和carbohydrate variants

       

      人纖溶酶
      人纖溶酶原的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)表示,其中:K1-K5 = 5個(gè)三環(huán)域,B-CHAIN =纖溶酶的催化結(jié)構(gòu)域,并且箭頭表示蛋白水解裂解的纖溶酶,彈性蛋白酶,和纖維蛋白溶酶原活化劑(PA'S)的位點(diǎn)。

      纖溶酶原是單鏈糖蛋白酶原,其在肝臟中合成并在血漿中以約2.4μM(1,2)的濃度循環(huán)。纖溶酶原分子在Lys77和Arg560之間含有790個(gè)氨基酸,24個(gè)二硫鍵,沒有游離巰基和5個(gè)內(nèi)部序列同源區(qū)域,稱為kringles。這五個(gè)三環(huán),三個(gè)二硫鍵橋接的kringle區(qū)域與t-PA,u-PA和凝血酶原中的三環(huán)結(jié)構(gòu)域同源。纖溶酶原含有一個(gè)高親和力(Kd = 9×10-6M)和四個(gè)低親和力(Kd = 5×10-3M)賴氨酸結(jié)合位點(diǎn)。高親和力結(jié)合位點(diǎn)位于纖溶酶原的個(gè)三環(huán)區(qū)域內(nèi)。纖溶酶原與纖維蛋白和α2-抗纖溶酶的相互作用由這些賴氨酸結(jié)合位點(diǎn)介導(dǎo)。天然葡萄糖原纖維蛋白原(Mr = 88,通過Lys76-Lys77肽鍵的纖溶酶水解,很容易將000)轉(zhuǎn)化為Lys-77-纖溶酶原(Mr = 83,000)。彈性蛋白酶催化裂解葡萄糖 - 纖溶酶原的Val441-Val442肽鍵產(chǎn)生功能活性的酶原,稱為Val-442纖溶酶原或微纖溶酶原。

      纖溶酶原向纖溶酶的轉(zhuǎn)化通過多種機(jī)制發(fā)生,但都導(dǎo)致纖溶酶原的Arg560-Val561肽鍵水解,產(chǎn)生兩條鏈,其通過二硫鍵保持共價(jià)結(jié)合。

      通過改進(jìn)Castellino(3)的方法,利用凝膠過濾和親和層析,從新鮮冷凍的人血漿制備天然的葡糖胺原。通過使用賴氨酸類似物e-氨基己酸(3)從賴氨酸 - 瓊脂糖凝膠梯度洗脫分離葡糖 - 纖溶酶原(CHOI和CHOII)的兩種碳水化合物變體。纖溶酶原以50%(體積/體積)甘油/ H 2 O供應(yīng),在-20℃下儲存。通過SDS-PAGE分析確定純度。

       

       

      第1巷

      人類Glu-纖溶酶原(HCPG-0130)減少

      第2巷

      人類Glu-纖溶酶原CHOI(HCPG-0131)減少

      第3巷

      人類Glu-纖溶酶原CHOII(HCPG-0132)減少

      第4巷

      人Lys-纖溶酶原(HCPG-0133)降低
      標(biāo)記:見藍(lán)+ 2_MOPS

      第5巷

      人類Glu-纖溶酶原(HCPG-0130)未還原

      第6巷

      HumanGlu-Plasminogen CHOI(HCPG-0131)非紅色

      第7巷

      人類Glu-纖溶酶原CHOII(HCPG-0132)非紅色

      第8巷

      人賴氨酸 - 纖溶酶原(HCPG-0133)未還原

      凝膠

      Novex 4-12%Bis-Tris

      加載

      每道1微克

      緩沖

      MOPS

      標(biāo)準(zhǔn)

      SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

       

      本土化

      等離子體

      血漿濃度

      2.4μM(人類)(4)

      行動(dòng)方式

      酶原; 絲氨酸蛋白酶纖溶酶的前體

      分子量

      88,000(glu plasminogen)(5)
      83,000(lys-plasminogen)(5)
      38,000(val-plasminogen)(6)

      消光系數(shù)

      Ë

      1%

      1厘米,280納米

       

      = 17.0(5)

       

      等電點(diǎn)

      6.2(??glu-plasminogen)(1)
      6.7-8.3(lys-plasminogen)(1)

      結(jié)構(gòu)體

      單鏈,24個(gè)鏈內(nèi)??二硫橋,5個(gè)三環(huán)區(qū)。

      碳水化合物百分比

      大約2%

       

      1. Robbins,KC,Methods in Enzymology,45,257(1976)。
      2. Collen,D.in Blood Coagulation,Zwaal,REA and Hemker,HC,eds。,pp.243-258,New York,Elsevier(1986)。
      3. Castellino,F(xiàn)J,et al。,Methods in Enzymology,80,365(1981)。
      4. Wohl,RC等,Thromb。Res。,27 523(1982)。
      5. Barlow,GH等,Biochemistry,23,2384(1984)。
      6. Sottrup-Jensen,L.,et al。,in Progress in Chemical Fibrinolysis and Thrombolysis,Vol。3,編輯。JF Davidson,7。RM Rowan,MM Samana,PC Desnoyers,pp.197-228,New York:Raven Press(1975)

       

       

       

      HCPG-0130 人類 葡萄糖 -纖溶酶原

        |  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

       

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

       

      活動(dòng)決定

      <10ppm纖溶酶活性

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

      •  

       HCPG-0131 人類 葡萄糖 -纖溶酶原CHOI

      •  

       

      •  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動(dòng)決定

      N / A

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

      •  
      •  

       HCPG-0132 人體葡萄糖原纖維蛋白原CHOII

      •  

       

      •  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動(dòng)決定

      N / A

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

      •  
      •  

       HCPG-0133 人類賴氨酸 - 纖溶酶原

      •  

       

      •  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動(dòng)決定

      N / A

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

      •  
      •  

       BCPG-1130 Bovine glu-Plasminogen 

      •  

       

      •  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動(dòng)決定

      <100ppm纖溶酶活性

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

      •  
      •  

       MCPG-5130 小鼠glu-plasminogen

      •  

       

      •  

      尺寸

      100微克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動(dòng)決定

      <100ppm纖溶酶活性

      保質(zhì)期(妥善保存)

      12個(gè)月

      •  

       

       

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