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      Haematologic HCPG-0133說明書

       發布時間:2018/10/16 點擊量:385

      Haematologic HCPG-0133說明書

      HTI HCPG-0133

       

      Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。

       

      Haematologic HCPG-0133說明書

      glu-Plasminogen,lys-Plasminogen和carbohydrate variants

       

      人纖溶酶
      人纖溶酶原的結構域結構表示,其中:K1-K5 = 5個三環域,B-CHAIN =纖溶酶的催化結構域,并且箭頭表示蛋白水解裂解的纖溶酶,彈性蛋白酶,和纖維蛋白溶酶原活化劑(PA'S)的位點。

      纖溶酶原是單鏈糖蛋白酶原,其在肝臟中合成并在血漿中以約2.4μM(1,2)的濃度循環。纖溶酶原分子在Lys77和Arg560之間含有790個氨基酸,24個二硫鍵,沒有游離巰基和5個內部序列同源區域,稱為kringles。這五個三環,三個二硫鍵橋接的kringle區域與t-PA,u-PA和凝血酶原中的三環結構域同源。纖溶酶原含有一個高親和力(Kd = 9×10-6M)和四個低親和力(Kd = 5×10-3M)賴氨酸結合位點。高親和力結合位點位于纖溶酶原的個三環區域內。纖溶酶原與纖維蛋白和α2-抗纖溶酶的相互作用由這些賴氨酸結合位點介導。天然葡萄糖原纖維蛋白原(Mr = 88,通過Lys76-Lys77肽鍵的纖溶酶水解,很容易將000)轉化為Lys-77-纖溶酶原(Mr = 83,000)。彈性蛋白酶催化裂解葡萄糖 - 纖溶酶原的Val441-Val442肽鍵產生功能活性的酶原,稱為Val-442纖溶酶原或微纖溶酶原。

      纖溶酶原向纖溶酶的轉化通過多種機制發生,但都導致纖溶酶原的Arg560-Val561肽鍵水解,產生兩條鏈,其通過二硫鍵保持共價結合。

      通過改進Castellino(3)的方法,利用凝膠過濾和親和層析,從新鮮冷凍的人血漿制備天然的葡糖胺原。通過使用賴氨酸類似物e-氨基己酸(3)從賴氨酸 - 瓊脂糖凝膠梯度洗脫分離葡糖 - 纖溶酶原(CHOI和CHOII)的兩種碳水化合物變體。纖溶酶原以50%(體積/體積)甘油/ H 2 O供應,在-20℃下儲存。通過SDS-PAGE分析確定純度。

       

       

      第1巷

      人類Glu-纖溶酶原(HCPG-0130)減少

      第2巷

      人類Glu-纖溶酶原CHOI(HCPG-0131)減少

      第3巷

      人類Glu-纖溶酶原CHOII(HCPG-0132)減少

      第4巷

      人Lys-纖溶酶原(HCPG-0133)降低
      標記:見藍+ 2_MOPS

      第5巷

      人類Glu-纖溶酶原(HCPG-0130)未還原

      第6巷

      HumanGlu-Plasminogen CHOI(HCPG-0131)非紅色

      第7巷

      人類Glu-纖溶酶原CHOII(HCPG-0132)非紅色

      第8巷

      人賴氨酸 - 纖溶酶原(HCPG-0133)未還原

      凝膠

      Novex 4-12%Bis-Tris

      加載

      每道1微克

      緩沖

      MOPS

      標準

      SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

       

      本土化

      等離子體

      血漿濃度

      2.4μM(人類)(4)

      行動方式

      酶原; 絲氨酸蛋白酶纖溶酶的前體

      分子量

      88,000(glu plasminogen)(5)
      83,000(lys-plasminogen)(5)
      38,000(val-plasminogen)(6)

      消光系數

      Ë

      1%

      1厘米,280納米

       

      = 17.0(5)

       

      等電點

      6.2(??glu-plasminogen)(1)
      6.7-8.3(lys-plasminogen)(1)

      結構體

      單鏈,24個鏈內??二硫橋,5個三環區。

      碳水化合物百分比

      大約2%

       

      1. Robbins,KC,Methods in Enzymology,45,257(1976)。
      2. Collen,D.in Blood Coagulation,Zwaal,REA and Hemker,HC,eds。,pp.243-258,New York,Elsevier(1986)。
      3. Castellino,FJ,et al。,Methods in Enzymology,80,365(1981)。
      4. Wohl,RC等,Thromb。Res。,27 523(1982)。
      5. Barlow,GH等,Biochemistry,23,2384(1984)。
      6. Sottrup-Jensen,L.,et al。,in Progress in Chemical Fibrinolysis and Thrombolysis,Vol。3,編輯。JF Davidson,7。RM Rowan,MM Samana,PC Desnoyers,pp.197-228,New York:Raven Press(1975)

       

       

       

      HCPG-0130 人類 葡萄糖 -纖溶酶原

        |  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

       

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

       

      活動決定

      <10ppm纖溶酶活性

      保質期(妥善保存)

      12個月

      •  

       HCPG-0131 人類 葡萄糖 -纖溶酶原CHOI

      •  

       

      •  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動決定

      N / A

      保質期(妥善保存)

      12個月

      •  
      •  

       HCPG-0132 人體葡萄糖原纖維蛋白原CHOII

      •  

       

      •  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動決定

      N / A

      保質期(妥善保存)

      12個月

      •  

       HCPG-0133 人類賴氨酸 - 纖溶酶原

      •  

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動決定

      N / A

      保質期(妥善保存)

      12個月

      •  
      •  

       BCPG-1130 Bovine glu-Plasminogen 

       

      尺寸

      1毫克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動決定

      <100ppm纖溶酶活性

      保質期(妥善保存)

      12個月

      •  
      •  

       MCPG-5130 小鼠glu-plasminogen

      •  

       

      •  

      尺寸

      100微克

      公式

      50%甘油/水(v / v)

      •  

      存儲

      -20℃下

      純度

      通過SDS-PAGE> 95%

      •  

      活動決定

      <100ppm纖溶酶活性

      保質期(妥善保存)

      12個月

      •  

       

       

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